藏药甘青乌头化学成分研究

摘要 对甘青乌头Aconitum tanguticum全草的化学成分进行研究。应用硅胶，ODS，Sephadex LH-20，制备HPLC等各种色谱技术进行分离纯化，采用MS，NMR等波谱技术鉴定化合物结构。甘青乌头乙醇总提取物经石油醚、乙酸乙酯萃取后的剩余水溶液经AB-8大孔吸附树脂，依次用水，30%，60%，95%乙醇洗脱，合并回收溶剂分别得到各洗脱部分。从30%，60%乙醇洗脱部分共分离得到19个化合物，分别鉴定为紫丁香苷（1），香草酸4-O-β-D-阿洛糖苷（2），阿魏酸4-O-β-D-阿洛糖苷（3），阿魏酸4-O-β-D-葡萄糖苷（4），芥子酸4-O-β-D-葡萄糖苷（5），4-羟基-肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷（6），槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-（1→2）-[α-L-鼠李糖基-（1→6）]-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷（7），山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-（1→2）-[α-L-鼠李糖基-（1→6）]- β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷（8），槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基（1→6）-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷（9），山柰酚-3-O-[β-D-葡萄糖基-（1→3）-（4-O-反式-对香豆酰基）]-α-L-鼠李糖基-（1→6）-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷（10），槲皮素-3-O-[β-D-葡萄糖基-（1→3）-（4-O-反式-对香豆酰基）]-α-L-鼠李糖基-（1→6）-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷（11），红景天苷（12），2-（3，4-二羟基苯基）乙醇 1-O-β-D-葡萄糖苷（13），（7S，8R）-去氢二松柏醇-9′-O-β-D-葡萄糖苷（14），citrusin B （15），异叶乌头碱（16），tanaconitine（17），山栀苷甲酯（18）和淫羊藿次苷B₁（19）。除化合物4，13，16和17外，其余化合物均为首次从甘青乌头中分离得到。

关键词 甘青乌头；化学成分；苯丙素；黄酮；木脂素

收稿日期 2013-05-20

基金项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目（ZZ070828）；北京市自然科学基金项目（7132152）

通信作者 *李春，Tel：（010）-64014411-2984，E-mail： lichun@icmm.ac.cn

甘青乌头Aconitum tanguticum（Maxim.）Stapf 为毛茛科乌头属植物甘青乌头的干燥全草，生长于海拔3 200～4 800 m的高山草甸及碎石带，主要分布于青海东部、西藏南部、甘肃南部、四川西部和云南西北部，陕西秦岭也有分布，为藏医常用药物榜嘎的药材来源之一[1]。榜嘎始载于藏医的医药古籍《月王药诊》（公元710年）中，其后《四部医典》、《四部医典注释本》、《晶珠本草》等历代藏医药书籍中均有记述。榜嘎性凉、味苦，有小毒，具清热解毒功效，多入丸散用于治疗传染病发热，肝、胆热病，肺热，肠热，流行性感冒和食物中毒等[2]。文献报道已从甘青乌头中分离得到大量二萜生物碱类化合物[3-11]，但对于其中的非生物碱类成分的研究很少[12-13]。课题组前期对甘青乌头各极性段的抗炎镇痛活性进行了研究，结果显示其大极性部位具有良好抗炎镇痛活性[14]，因此为明确其药效物质基础，本文对甘青乌头大极性部位的化学成分进行了系统研究，利用各种色谱技术和波谱分析方法，分离鉴定了19个化合物，其中15个为首次从甘青乌头中分离得到。

1 材料

Bruker Advance 600 核磁共振谱仪，内标为TMS；Agilent 6250 Accurate-Mass Q-TOF LC/MS 质谱仪；Agilent 6130SQ-MSD质谱仪；Nicolet 5700 FT-IR 光谱仪（美国Thermo Nicolet 公司）；T6新世纪紫外-可见分光光度仪（北京普析通用有限责任公司）；Agilent 7890 A气相色谱仪，FID检测器为Agilent 6130SQ-MSD；RUDOLPH Autopol Vplus旋光仪（美国鲁道夫公司）；X-4显微熔点仪（编号830710080158，上海精密科学仪器有限公司）；Waters1515型高效液相色谱仪；LC3000型高压制备液相色谱仪（北京创新通恒科技有限公司生产）。

柱色谱硅胶200～300目（青岛海洋化工厂）；Sephadex LH-20（GE公司，瑞典）；ODS （50 μm，YMC Co.，日本）；高效薄层板GF254（Merck公司，德国）；AB-8大孔吸附树脂（净品级，南开大学化工厂，天津）；Intersil C₁8 制备色谱柱（20 mm×250 mm，10 μm，GL Sciences Inc.，日本）；Hypersil C₁₈分析用色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm，Thermo 公司）；HP-5气相色谱柱（0.32 mm×30 m，0.25 μm）。

常规提取分离用甲醇、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、乙醇、无水乙醇、甲酸等均为北京化工厂分析纯产品。高效液相用色谱甲醇和乙腈为Fisher公司产品。水为娃哈哈纯净水。

甘青乌头于2010年8月购于青海三江宝商贸有限公司，经中国中医科学院中药研究所冯学峰研究员鉴定为毛茛科乌头属植物甘青乌头A. tanguticum的干燥全草。

2 提取与分离

干燥的甘青乌头全草（10 kg），粉碎，用95%乙醇热回流提取3次，每次2 h，乙醇加入量分别为8，6，6倍药材量，过滤，合并滤液，减压回收溶剂至无醇味；混悬液加水稀释至一定体积，依次用石油醚，乙酸乙酯萃取，分别合并各部分萃取液，回收溶剂得石油醚浸膏（256.04 g）和乙酸乙酯浸膏（130.39 g）；剩余水溶液上AB-8大孔吸附树脂柱，依次用水，30%，60%，95%乙醇洗脱，分别合并各部分洗脱液，减压回收溶剂至干，得水部分（605.00 g），30%乙醇部分（407.97 g），60%乙醇部分（107.0 g）和95%乙醇部分（5.23 g）。