吡蚜酮防治茶树假眼小绿叶蝉的效果评价及其残留分析

材料与方法

1.1试验材料

HP1100液相色谱仪（配UV检测器），IKA-T25均质器，PHILIPS食品加工机，FZ102粉碎机，R-1001N旋转蒸发仪，KQ3200B型超声波清洗器，振荡器，玻璃层析柱（长15 cm，内径1.0 cm）。甲醇，色谱纯；超纯水；3%氨水-甲醇溶液；盐酸水溶液（5 mmol/L）。

供试药剂：99.1%吡蚜酮标准品，上海佳和生物科技有限公司产品，用甲醇配制0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/L的吡蚜酮标准溶液；25%吡蚜酮悬浮剂，江苏克胜集团股份有限公司产品；25 g/L联苯菊酯乳油，山东中诺药业有限公司产品；240 g/L虫螨腈悬浮剂，广东德利生物科技有限公司产品；25%噻虫嗪水分散粒剂，瑞士先正达作物保护有限公司产品；10%吡虫啉可湿性粉剂，上海农乐生物制品股份有限公司产品。

供试茶树品种：黄山群体种。

试验地点：泰安小津口茶园。

1.2田间试验设计

1.2.1田间药效试验试验设25%吡蚜酮悬浮剂有效量112.50、168.75、225.00 g/hm2，25 g/L联苯菊酯乳油有效量33.75 g/hm2，240 g/L虫螨腈悬浮剂有效量72.00 g/hm2，25%噻虫嗪水分散粒剂有效量18.75 g/hm2，10%吡虫啉可湿性粉剂有效量27.00 g/hm2和清水对照共8个处理。小区面积21.5 m2，随机区组排列，重复4次。每公顷用水量675 L。调查方法按GB/T 17980.56-2004农药田间药效试验准则：杀虫剂防治茶树叶蝉的规定进行。利用DPS统计分析软件进行差异显著性分析。

1.2.2消解动态试验参照文献[8]的方法，进行25%吡蚜酮悬浮剂在茶树和土壤中的残留消解动态试验。茶树消解动态试验：小区面积333 m2，25%吡蚜酮悬浮剂300 mg a.i./L喷雾处理。施药后间隔2 h及1、3、5、7、10、14、21 d，按随机法采集新鲜的茶叶样品，测定吡蚜酮在茶树鲜叶上的残留消解半衰期。土壤消解动态试验：在茶园地另辟一块空地（30 m2），按300 mg a.i./L喷雾处理，施药后间隔2 h及1、3、5、7、10、14、21 d，按随机法选择6～12个点，采集0～10 cm土壤样品，测定吡蚜酮在土壤中的残留消解半衰期。

1.2.3最终残留试验在茶园设置试验区333 m2，分为5个小区，并设空白对照区。试验设25%吡蚜酮悬浮剂200 mg a.i./L 1次施药（处理1）、200 mg a.i./L 2次施药（处理2）、300 mg a.i./L 1次施药（处理3）、300 mg a.i./L 2次施药（处理4）4个处理。2次施药处理区施药间隔7 d，第2次施药时，1次施药处理区开始施药。各处理区于末次施药后5、7、14 d，按随机法采集新鲜的茶叶和土壤（0～10 cm土层）样品。茶叶样品采回后及时制成成品茶叶样品。测定干茶、土壤中吡蚜酮的残留量。

1.3分析、测定方法

提取：称取鲜茶叶、干茶叶及干土壤各20.0 g，鲜茶叶加入100 mL盐酸水溶液，干茶叶加入100 mL甲醇，分别于IKA-T18均质器中均质2 min；干土壤加入100 mL甲醇于振荡器上振荡1 h。将3份样品放于KQ-250DB型数控超声波清洗器中超声1 h，浸泡过夜，次日抽滤。鲜茶叶用20 mL盐酸水溶液、干茶叶及干土壤用20 mL甲醇数次清洗残渣，转移至250 mL圆底烧瓶中，于45℃水浴中旋转蒸发浓缩至近干，用30 mL盐酸水溶液溶解，待净化。

净化：采用SCX固相萃取小柱（500 mg/6 mL）净化，样品先用10 mL甲醇，再10 mL水预淋小柱进行柱条件化，将提取液上柱，3 mL/min流速过柱，再先用10 mL水， 后10 mL甲醇淋脱小柱，并弃掉滤液，用3%氨水-甲醇溶液10 mL洗脱小柱，收集，于45℃水浴中旋转蒸发浓缩至近干，用甲醇定容至2 mL，待高效液相色谱测定。

检测条件：Agilent TC-C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm） ；检测波长：299 nm ；柱温：35℃；进样量10 μL；流动相：甲醇∶水=3∶7，流速：0.8 mL/min。

2结果与分析

2.1吡蚜酮防治茶树假眼小绿叶蝉的效果

由表1可以看出，25%吡蚜酮悬浮剂防治茶树假眼小绿叶蝉具有较好的速效性与持效性，施药后1 d防效超过75%，且随药后天数增加，其低、中、高剂量处理的防效均逐渐增加，至药后7 d，达最高（84%以上），而后逐渐降低。经方差分析，25%吡蚜酮悬浮剂低、中、高剂量处理间防效差异不显著；药后1、3 d，25%吡蚜酮悬浮剂中、高剂量处理防效低于240 g/L虫螨腈悬浮剂72.00 g a.i./hm2和25 g/L联苯菊酯乳油处理，高于25%噻虫嗪水分散粒剂处理和10%吡虫啉可湿性粉剂处理，但差异不显著。药后7 d，25%吡蚜酮悬浮剂各剂量防效显著优于对照药剂10%吡虫啉可湿性粉剂处理，与其他3个对照药剂防效无显著差异。药后14 d，25%吡蚜酮悬浮剂168.75、225.00 g a.i./hm2处理与对照药剂10%吡虫啉可湿性粉剂27.00 g a.i./hm2处理差异显著，与其他3个对照药剂无显著差异。田间观察表明，25%吡蚜酮悬浮剂对茶树生长未产生不良影响。

2.2吡蚜酮在鲜茶叶、土壤中的残留消解动态

由图1可以看出，25%吡蚜酮悬浮剂在茶树上用300 mg a.i./L喷施，在鲜茶叶、土壤上的消解动态方程分别为y=1.2857e-0.226x、y=1.245e-0.105x，消解半衰期分别为3.0 d和6.5 d。吡蚜酮在茶叶和土壤中消解动态符合一级动力学方程。

2.3吡蚜酮在干茶叶、土壤中的最终残留量

由图2看出， 25%吡蚜酮悬浮剂200 mg a.i./L 2次施药（处理1）在干茶中的残留量药后5、7、14 d分别为0.116、0.058、0.018 mg/kg。25%吡蚜酮悬浮剂200 mg a.i./L 1次施药（处理2）在干茶中的残留量药后5、7、14 d分别为0.108、0.045、0.023 mg/kg。25%吡蚜酮悬浮剂在茶园中300 mg a.i./L 2次施药（处理3）在干茶中的残留量药后5、7、14 d分别为0.154、0.083、0.035 mg/kg。25%吡蚜酮悬浮剂300 mg a.i./L 1次施药处理（处理4）在干茶中的残留量药后5、7、14 d分别为0.138、0.068、0.029 mg/kg。

试验测定结果表明，上述4个试验处理吡蚜酮在土壤中的最终残留量均<0.010 mg/kg。

3结论与讨论

吡蚜酮作为刺吸式口器害虫的高效新型杀虫剂，对蔬菜、花卉、棉花以及果树上的刺吸式口器害虫均表现出良好的防治效果。本研究中，吡蚜酮防治茶树假眼小绿叶蝉见效快、防效好，与较早登记防治茶树叶蝉的杀虫剂联苯菊酯、虫螨腈、噻虫嗪等，防治效果相近，适于推广应用。前人研究还发现吡蚜酮的作用方式独特，对刺吸式口器害虫无“击倒”活性，但具有“停食效应”，并且这一过程是不可逆的，这种作用方式被称为“口针穿透阻塞”，吡蚜酮的这种快速效应，可以有效降低刺吸口器害虫对植物病毒病的传播机会，这也是吡蚜酮引起国内外广泛关注的原因之一。

近年来，随着人们生活质量要求的提高和茶叶对外贸易的扩大，涉及茶叶农药残留的质量安全问题也有所增加。吡蚜酮消解动态试验研究表明，25%吡蚜酮悬浮剂在鲜茶叶、土壤中消解半衰期分别为3.0、6.5 d，消解较快，属于易降解农药。在2014年我国卫生部和农业部联合发布的食品安全国家标准——食品中农药最大残留限量（GB2763-2014）中，与茶叶有关的农药检测项目28项，尚无规定吡蚜酮在茶叶中的最大残留限量（MRLs）。在欧盟与英国，茶叶中吡蚜酮的MRLs值为0.10 mg/kg，日本规定大米、苹果中吡蚜酮MRLs 值均为0.10 mg/kg。从本研究结果来看，25%吡蚜酮悬浮剂在茶叶中常规剂量200 mg a.i./kg喷施，1次施药处理与2次施药处理7 d后取样，茶叶中最大残留量分别为0.045、0.058 mg/kg，低于欧盟规定的最大残留限量（MRLs）0.10 mg/kg，安全间隔期7 d，喷药次数不得超过2次。当然，茶叶作为一种健康食品，大量使用化学农药会给茶叶安全生产带来影响，因此在防治茶树假眼小绿叶蝉时，应结合农业防治、生物防治、物理防治，合理使用高效低毒低残留的化学农药，保障茶叶质量安全，提高茶叶品质，促进茶产业的可持续发展。

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