26种杀菌剂对柑橘砂皮病菌的室内毒力测定

材料与方法

1.1 供试菌种来源

供试菌株为柑橘砂皮病菌，由湖南农业大学植物保护学院植物病理系实验室提供。试验前将菌株在马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上进行活化。

1.2 实验仪器

SW-CJ-1D型单人净化工作台（苏州净化设备有限公司产品），MJP-250D型霉菌培养箱（上海森信实验仪器有限公司）以及电子天平、移液枪、量筒、玻璃棒、容量瓶、培养皿、接种针、打孔器、封口膜、直尺、铅笔等。

1.3 供试药剂

供试药剂见表1（剂型代码：可湿性粉剂为WP，水分散粒剂为WDG，水乳剂为EW，悬浮剂为SC，乳油为EC，原药为TC）。

1.4 试验方法

采用生长速率法测定杀菌剂对柑橘砂皮病菌的毒力，根据杀菌剂的性质和登记使用剂量参考，用无菌水配制成不同浓度的药液，每种杀菌剂设置5个浓度梯度。取1 mL药液（1 mL无菌水作为对照）与27 mL PDA培养基混合均匀制成含药平板，再平均倒入5个（即5次重复）直径为7 cm且无菌的培养皿中。用直径5 mm的打孔器在砂皮病菌的菌落上打取带菌培养基柱（菌饼），并用无菌或消毒的接种针或金属镊子将菌饼接入冷凝后的培养平板中央。接种培养皿置于27℃恒温培养箱中培养，5 d后用十字交叉法测量菌落直径，计算菌丝生长抑制率，并采用DPS软件进行生物测定分析，求得不同比例的毒力回归方程、相关系数（r）和EC50值。

菌丝生长抑制率=（对照组的菌落直径-处理组的菌落直径）/对照组的菌落直径×100%。

吡唑醚菌酯TC和代森锰锌TC杀菌剂混配联合毒力测定：根据单剂毒力测定结果，将杀菌剂中毒力最高的吡唑醚菌酯TC和代森锰锌TC进行混配，有效成分配比为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9，每个配比制成相应5个浓度梯度。计算混配剂对菌丝生长的抑制率，并采用DPS软件进行生物测定分析，求得不同比例的毒力回归方程、相关系数（r）和EC50值。采用Wadley法进行增效作用评价。当增效系数SR>1.5时为增效作用，0.5≤SR≤1.5为相加作用，SR<0.5为拮抗作用。

式中：A、B分别代表两种杀菌剂，a、b分别代表2种杀菌剂在混配剂中所占比例，ob为实际值，th为理论值。

2 结果与分析

2.1 26种杀菌剂对柑橘砂皮病菌菌丝生长的毒力测定

结果如表2所示，供试的26种杀菌剂对柑橘砂皮病菌菌丝生长均有不同程度的抑制作用，但各杀菌剂之间存在比较明显的差异。其中250 g/L吡唑醚菌酯EC、50%吡唑醚菌酯WDG和12%苯甲·氟酰胺SC对柑橘砂皮病菌菌丝生长抑制作用较强，EC50都在0.3 mg/L以下。250 g/L吡唑醚菌酯EC对柑橘砂皮病菌的抑制活性最高，EC50为0.200 1 mg/L。在80%代森锰锌WP、50%啶酰菌胺WDG和70%丙森锌WP这3种保护性杀菌剂中，80%代森锰锌WP对柑橘砂皮病菌的抑制作用最高，EC50为3.394 6 mg/L。因此选用吡唑醚菌酯TC和代森锰锌TC进行复配联合毒力测定。

2.2 吡唑醚菌酯TC和代森锰锌TC混配联合毒力测定

由表3可知，吡唑醚菌酯TC与代森锰锌TC以1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8和1∶9的比例混配对柑橘砂皮病菌的EC50分别为0.122 9、0.155 9、0.124 0、0.092 0、0.084 2、0.107 0、0.124 2、0.141 4、0.130 6 mg/L，各比例均表現出了明显的抑菌作用。且各比例的EC50均小于吡唑醚菌酯TC单剂和代森锰锌TC单剂的EC50，表明所有比例的混配剂对柑橘砂皮病菌的抑制效果明显强于单剂。从增效系数（SR）来看，所有比例的SR均大于1.5，都表现为增效作用，其中增效作用最强的为1∶5，增效系数（SR）为7.629 5，其次为1∶9，增效系数（SR）为7.036 0。

3 结 论

菌丝生长速率抑制法的毒力测定结果表明，26种杀菌剂对柑橘砂皮病菌的EC50由大到小的顺序为：250 g/L吡唑醚菌酯EC>50%吡唑醚菌酯WDG>12%苯甲·氟酰胺SC>450 g/L咪鲜胺EW>70%甲基硫菌灵WDG>42.8%氟菌·肟菌酯SC>22%抑霉唑EW>75%多·锰锌WP>17%唑醚·氟环唑SC>10%己唑醇SC>18%松脂酸铜EC>27.8%噻呋·己唑醇SC>75%百菌清WDG>4%四氟醚唑EW>50%苯菌灵WP>60%锰锌·腈菌唑WP>65%代森锌WP>16%咪鲜·异菌脲SC>430 g/L戊唑醇SC>80%代森锰锌WP>20%烯肟·戊唑醇SC>40%丁香·戊唑醇SC>325 g/L苯甲·嘧菌酯SC>50%啶酰菌胺WDG>80%克菌丹WDG>70%丙森锌WP，其中250 g/L吡唑醚菌酯EC对菌丝生长抑制作用最强，EC50为0.200 1 mg/L;70%丙森锌WP对菌丝生长抑制作用最弱，EC50为16.181 9 mg/L。在本试验中，对吡唑醚菌酯TC和代森锰锌TC进行复配，结果表明，吡唑醚菌酯TC和代森锰锌TC以质量比为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8和1∶9复配时都表现出增效作用，其中1∶5的增效作用最明显，增效系数（SR）为7.629 5。表明二者复配协同效果非常好，具有开发潜力，可作为农业上防治柑橘砂皮病的参考依据。

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