摘要 通过加标回收的方法，对气相色谱法检测蔬菜和水果中农药残留样品前处理试验方法的准确性进行了评估，并提出了气相色谱法检测蔬菜和水果中农药残留合理的样品前处理方案。
关键词 气相色谱法；检测；农药残留；前处理
中图分类号 O657；S481+.8 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）17-0167-01
实验室检测蔬菜和水果中多组分农药残留，通常都采用标准NY/761-2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》[1]的简捷处理、快速分析的过程。然而，要保证检测的精度和准确度，标准流程中还是有很多技术要点必须加以注意[2-6]，特别是对于样品前处理这一环节。本文从检测1 000份样品的实践、试验对比中，针对样品前处理过程中应注意的几个环节进行比较分析，确定了前处理过程中较好的技术参数。
1 材料与方法
1.1 仪器设备
试验中用到的仪器主要包括：电子捕获检测器（ECD）、岛津GC-2010气相色谱仪、Agilent 6890气相色谱仪、火焰光度检测器（FPD）、色谱柱为DB-1701和DB-1毛细管色谱柱30.0 m×0.25 mm（0.32 mm）×0.25 μm、超声波清洗器、高速组织匀浆机、氮吹仪、旋涡混合器、高速离心机。
1.2 试剂及材料
供试试剂主要包括：乙腈、正己烷、丙酮、氯化钠、SPE佛罗里硅土净化柱。试验中所使用的试剂均为进口色谱纯。
农药标准品主要包括甲胺磷、甲拌磷、氧乐果、乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、对硫磷、百菌清、腐霉利、三唑酮、甲氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯，以上标准品购自农业部环境质量监督检验测试中心（天津）。单一标准储备液浓度1 000 μg/mL，混合储备液（加标液）浓度5 mg/kg，上机浓度1.00 mg/kg、0.25 mg/kg。蔬菜和水果为无公害基地抽检样品。
1.3 试验方法
采取分段加标回收的方式进行试验，对于样品的提取以及上机测试要严格按照NY/T761—2008的方法进行。试验中，要进行多次重复试验，比对一些关键的技术环节对样品标准回收率的影响，包括样品的均一性、提取时间、提取速率、提取液的盐析分离程度、静置时间、蒸发浓缩及净化过程等[7-10]。
1.3.1 样品均一性比较试验。为了保证方法的平行及准确，试验的样品制备所用器具要逐一清理，避免发生交叉污染。将新鲜的样品切至小块的段或块，大小为1 cm×1 cm。然后将部分样品块放置到冰箱中进行冷冻处理，前处理在提取的过程中需要充分地搅匀后，然后用高速组织匀浆机将品种充分地打碎。全部试样分别加标浓度0.2 mg/kg。试验共设6个处理，分别为：保鲜24 h、保鲜48 h、冷冻24 h、冷冻48 h、冷冻72 h，以鲜样加标立刻处理作为对照（CK）。保鲜处理的温度控制在4～6 ℃，冷冻处理的温度控制在-17 ℃。
1.3.2 前处理关键技术环节对回收率的影响试验。样品的前处理技术包括提取、盐析、浓缩、净化等，这些步骤均比较关键，在每一步骤前应分别进行加标，以对提取的变量因子进行改变，以对不同步骤对提取回收率造成的影响进行考察。不同技术环节试验中，以无目标农药相同基体溶液添加等量标样为对照（CK），结合不同的试验结果及相关的资料，分析前处理的关键步骤对回收率的影响。
2 结果与分析
2.1 样品均一性比较
通过对样品均一性比较试验的分析，结果见表1。由此可知，试样在冰箱进行冷冻保存比保鲜存贮更有利于保持样品的均一性。因此，试样预处理样品应做到及时监测，不宜放置过长时间。而当试样由于不可抗因素（运输距离、实验室处理能力、停电停水等）导致无法及时检测时，以冷冻保存为佳。
2.2 前处理关键技术环节对回收率的影响
2.2.1 提取。多残留分析中，提取液必须满足在不同含水、油、糖量的情况下能萃取不同极性化合物的要求，通常将被测样品与萃取溶剂置于高速匀浆机中高速粉碎提取。通常该步骤中的提取液应选取有机溶剂乙腈，提取的时间应控制在合理的范围内，不能过长，在一定的范围内，样品提取的时间越长越好，但如果提取的时间过长，反而对整体的工作效率产生影响。试验结果表明，一般提取时间为15～20 min为宜，能够保证充分萃取，回收率可稳定在80%～115%。
2.2.2 盐析。盐析是在提取液中，加入适量无机盐至一定浓度，或达饱和状态，可使农药成份在水相中溶解度降低，从而与水溶性大的杂质分离。在盐析的过程中应充分地将样品摇匀，并充分静置。一般静置的时间应控制在60 min左右，使有机相和水相能够充分分开，回收率能够稳定在70%～100%。
2.2.3 浓缩。使用氮吹的方式对样品进行浓缩时，应将氮气的流量控制在合理的范围内，不可控制过大，浓缩的温度也不能过高，不能将样品彻底地吹干，而是在近干的状态下将其从水浴锅中取出，自然晾干，否则对于甲胺磷、甲拌磷等有机磷农药的回收率有较大的影响。
2.2.4 净化。固相萃取（SPE）是常用的净化手段，可作为一种有效的方式对样品基质中脂类等杂质进行去除。在样品进化过程中，为确保净化效果，流速应不超过2.0 mL/min，若流速过快，则可能导致菊酯类农药等大分子农药的回收率降低，或者样品净化不彻底，从而对回收率和重现性产生影响。
3 结论与讨论
试验结果表明，气相色谱法检测蔬菜和水果中多组分农药残留，在样品分析中，前处理所需时间占整个分析用时的2/3[3]。此外，由于前处理很难实现自动化[4]，因而90%的误差都来源于样品的前处理过程。通过多重复试验可以看出：必须保证样品均一性，严格掌握样品前处理的技术要点，才能避免人为误差，提高农药残留检测的工作效率和检测的准确性。综合考虑农药成分、试验温度、操作手法等因素，前处理过程中较好的方案为：预处理样品应做到即时监测或冷冻保存；提取时间为15～20 min；盐析操作要保证不发生乳化现象，充分摇匀后，一般静置约60 min；采取氮吹的方式进行浓缩时，氮气的流量应控制在合理的范围，不宜大，浓缩温度不能过高且样品应在近干状态下从水浴锅中取出，自然晾干为佳；净化过程中，流速应不超过2.0 mL/min。
4 参考文献
[1] 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定NY/T761-2008[S].北京：中国标准出版社，2008.
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