胶体金免疫层析试纸法检测农产品中戊唑醇残留

材料，建立了半定量胶体金免疫层析试纸条分析方法，实现裸眼观察确定戊唑醇残留，经ELISA鉴定此抗体对戊唑醇的检测灵敏度为0.07 ng/mL（IC20），IC50为 0.19 ng/mL[25]; 同时，建立了基于LC/MS-MS的检测方法，以小麦、黄瓜和甘蓝等样品为对象，进行了方法的验证，表明两种检测方法配合使用可以实现对戊唑醇的精准、快速检测，优势互补。其中，免疫层析试纸快速、方便，能用于现场检测，LC-MS/MS方法准确、灵敏，可用于大量样品的高通量定量检测。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

XYZ3050TM试纸条喷膜仪（Bio-Dot公司）; ZQ2000微电脑试纸条自动切割仪（上海金标生物科技有限公司）; Lambda25 UV-vis Spectrometer双光束紫外-可见分光光度计（美国Perkin Elmer公司）; Agilent Technologies 1260 Infinity高效液相色譜-质谱联用仪（美国Agilent公司）; Multiscan ascent 酶标仪（美国Thermo公司）; H-7650透射电子显微镜（日本日立公司）; 硝酸纤维素膜（NC膜）、金标结合垫、吸水垫（美国Millipore公司）; 聚氯乙烯（PVC）底板、样品垫（上海金标科技生物有限公司）; 超纯水净化仪（美国Labconco公司）。

戊唑醇标准品（农业部环境质量监督检验测试中心（天津））; 戊唑醇单克隆抗体（Teb McAb）及半抗原、包被原（Teb-OVA）由本实验室制备。羊抗小鼠IgG（武汉博士德生物工程有限公司）; 牛血清蛋白（BSA）、氯金酸（HAuCl4·3H2O）、二水合柠檬酸三钠（C6H5Na3O7·2H2O）（美国Sigma公司）; 其它试剂均为分析纯（西陇化工股份有限公司）。小麦粉产于江苏省农业科学院试验田，甘蓝、黄瓜购于南京某超市。

2.2 抗原的制备

2.2.1 半抗原的合成 戊唑醇半抗原的合成如图1所示， 以C5H10COOH基团取代戊唑醇苯环上的p-Cl，引入偶联臂和活性COOH基团，合成半抗原。