摘 要：目的 分析铜陵市义安区高危型HPV-DNA筛查结果，探讨HPV-DNA的临床价值。方法 对2016年3月～2016年5月义安地区1165例21～65岁妇女采用HPV-DNA检测筛查。结果 1165例标本中HPV-DNA阳性率为8.07%，共检测15种基因型，其中HPV52基因型感染率最高为1.89%，HPV11基因型感染率最低为0.09%，HPV单一感染发生率6.70%，二重HPV感染率0.94%，三重HPV感染率0.43%。结论 定期进行HPV-DNA检测，可以预测发生宫颈癌的风险，HPV分型检测对宫颈癌筛查具有重要的临床价值。
关键词：HPV-DNA；HPV分型；基因型；宫颈癌
中图分类号：R737.33 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.14.041
文章编号：1006-1959（2018）14-0136-03
Abstract：Objective To analyze the results of high risk HPV-DNA screening in Yian district，Tongling city，and to explore the clinical value of HPV-DNA.Methods From March 2016 to May 2016，1165 women aged 21 to 65 in Yian district were screened by HPV-DNA.Results The positive rate of HPV-DNA in 1165 cases was 8.07%，and 15 genotypes were detected.The highest HPV52 genotype infection rate was 1.89%，and the lowest HPV11 genotype rate was 0.09%.The incidence of HPV single infection was 6.70%，double HPV infection rate was 0.94%，the triple HPV infection rate was 0.43%.Conclusion HPV-DNA detection on a regular basis can predict the risk of cervical cancer and HPV typing has important clinical value for cervical cancer screening.
Key words：HPV-DNA；HPV typing；Genotype；Cervical cancer
人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是球形DNA病毒，能感染人体的表皮和黏膜组织，表现为寻常疣、生殖器疣（尖锐湿疣）等症状。随着性病中尖锐湿疣的发病率的上升和国家大力提倡的“两癌”筛查，人乳头瘤病毒（HPV）感染越来越引起人们的关注。根据世界卫生组织估计，全世界每年有超过47万新发宫颈癌病例[1]。宫颈癌是亚太区许多国家，包括中国，第二常见及全球第三常见的女性癌症。目前HPV感染在我国十分常见，每年约有13万人发病，防治形势十分严峻。HPV-DNA检测应用于宫颈癌前病变的检测已经取得了良好的效果，已成为当前临床研究的热点。故本文回顾性分析我中心在2016年3月～5月检测的1165例HPV标本，探讨HPV分型检测对宫颈癌筛查的意义及临床价值，现报道如下。
1资料与方法
1.1研究对象 统计2016年3月～5月送检合肥金域医学检验所有限公司实验诊断部基因诊断室的义安区HPV体检标本1165例，年龄25～64岁，平均年龄（30.54±5.82）岁。
1.2样本的采集与处理 用深圳亚能生物技术有限公司生产的专用宫颈脱落细胞采集器采集宫颈脱落细胞，标本采集后冷藏保存，经公司的冷链运输当日送达实验室检测。
1.3检测方法 试剂盒由亚能生物技术有限公司提供，严格按试剂盒说明书操作。一次性检测15 种HPV型别，包含低危型的HPV6、11和高危型的HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 和68型）。
1.4统计学分析 使用SPSS18. 0软件进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，行t检验，计数资料以（%）表示，行？字2 检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1义安地区1165例标本HPV感染年龄分布 1165例标本阳性率为8.07%（94/1065），其中30岁以下阳性率最高为14.95%（16/107），41～50岁女性阳性率最低为5.89%，见表1。
2.2义安地区HPV感染者基因型分布及HPV多重感染状况 共检测15种基因型，其中HPV52基因型感染率最高为1.89%，HPV11基因型感染率最低为0.09%，见表2。HPV感染者中，单一HPV感染78例，占6.70%，二重HPV感染11例，占0.94%，三重HPV感染5例，占0.43%，见表3。
3讨论
宫颈癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤。宫颈癌的发生率在所有癌症中排名第七位，而在妇女中排名第三，仅次于乳腺癌和大肠癌。在发展中国家，宫颈癌妇女五年存活率低于50%，而在发达国家，五年存活率是66%左右。研究发现HPV感染与宫颈癌关系密切，尤其13种高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 和68）感染与宫颈癌的发生和发展密切相关[2]，从高危人乳头瘤病毒感染到宫颈上皮内瘤变（CIN）再到宫颈癌的发生需要10年时间，因此，宫颈癌前病变的筛查非常有必要。HPV感染与宫颈癌及癌前病变问题具有密切的临床相关性，HPV持续感染是宫颈癌及癌前病变发展的必要条件，对HPV感染问题进行积极的预防治疗有助于及早对患者开展诊断和治疗，对于预防宫颈癌的发生有重要的现实意义[3]。
本次筛查对1165例女性标本进行检测，共检出94例阳性，阳性率为8.07%，30岁以下阳性率最高为14.95%，41～50岁女性阳性率最低为5.89%，与严粉琴等[4]报道的HPV阳性率为10.95%相似，但与Zeng Z等[5]报道的HPV阳性率为21.7%有差异，这可能是由于研究对象的不同，本研究为体检样本，选取的为健康女性样本。本研究结果，在HPV阳性人群中，高危型感染率排在前3位依次是HPV52（1.89%），HPV58（1.29%），HPV68（1.03%），吴明燕的研究[6]HPV52、HPV16、HPV58三种亚型最多见，且在亚洲国家52型和58型更为常见[7]，与本中心的筛查结果一致。HPV检测可以帮助临床医生能更好的找出感染者，判断她们的患癌的风险和周期，针对有早期病变的可以及时治疗，需要密切追踪的可以预防癌变的发生。大部分宫颈病变患者都能检测到HPV-DNA病毒，说明高危HPV-DNA病毒检测在筛查宫颈癌及癌前病变中的灵敏度较高，并且阴性预测值也非常高。大量的研究证实，高危型HPV-DNA病毒检测的阴性预测值可达99.0%[8]。本研究中，HPV单一感染的发生率为6.70%，二重HPV感染率为0.94%，三重HPV感染为0.43%，HPV多重感染并不会明显增加宫颈癌及高鳞状上皮内病变风险，但多重高危HPV感染要比单HPV感染致病性强，而高低危混合感染的宫颈致病性比单一HPV感染更弱[9]，宫颈癌的发生与HPV亚型感染总数多少无关，可能与高危亚型感染的致病力或协同力有关[10]。
HPV的筛查试剂和方法不少，主要分为分型的和不分型的。分型的目前以亚能生物的PCR反向点杂交法和透景生物的流式荧光法为主；不分型的以凯杰生物的第二代杂交捕获技术（HC2）为主，HC2是这些方法中唯一不需要PCR（聚合酶链式反应）进行样本DNA扩增的；当然，介于分型和不分型之间，还有一个比较重要的筛查方法是罗氏cobas 4800 HPV检测，能检测HPV16型、18型和其它12个高危型（HPV 31， 33， 35， 39， 45， 51， 52， 56， 58， 59， 66 和 68），其分型是能单独把HPV16、18分出来了，HPV16、18在所有导致宫颈癌的高危HPV中占到了70%。但是，这些筛查方法无法避免“假阳性”的出现，因为HPV的感染大多数人都是一过性的，靠自身免疫是可以清除的，如果患者在自身免疫清除前检查出感染HPV，会给患者造成困扰。要想解决这一问题，我们需要了解HPV致病的机理。HPVDNA的结构区域中E2是负性调控E6、E7区域，E6、E7是癌基因，HPVDNA整合到宿主細胞DNA是癌变的最终结果，同时也破坏了E2调控区，造成癌基因E6、E7的过表达。E6抑制 p53基因而阻断凋亡，E7 抑制pRB基因使细胞周期失控，大量的细胞周期失控而成为癌细胞。HPVDNA E6E7 mRNA的检测可以降低筛查中假阳性率。许多研究者提出对E6、E7癌蛋白表达过程中反映其转录活性的E6/E7 mRNA进行检测可能更能预测病情的进展[11，12]。
总之，宫颈癌的筛查工作任重道远，目前细胞学检查联合HPVDNA的检测仍然是主流的检测手段，针对筛查阳性的患者分流、确诊及后续的治疗需要探索更为科学合理的检测方法。
参考文献：
[1]韩钦，郭红燕.宫颈癌筛查方案的研究进展[J].微创医学，2016，11（2）：216-219.
[2]李萌辉，李世霞，刘俊田.两种高危型HPV检测方法在宫颈癌早期筛查中的应用[J].中国肿瘤临床，2013（21）：1300-1303.
[3]苏燕燕.宫颈癌及其癌前病变与HPV感染的相关临床分析[J].中外女性健康研究，2016（2）：236-237.
[4]严粉琴，耿建祥，肖微，等.已婚女性宫颈上皮细胞中人乳头瘤病毒基因分型2000分析[J].实用妇产科杂志，2012，5（28）： 390-393.
[5]Zeng Z，Marshall A R，He X，et al.Prevalence of High-Risk Human Papillomavirus Infection in China：Analysis of 671，163 Human Papillomavirus Test Results From China"s Largest College of American Pathologists-Certified Laboratory[J].American Journal of Clinical Pathology，2016，145（5）：622.
[6]吴云燕，裘明利.女性高危型人乳头瘤病毒感染分布情况研究[J].中国实用妇科与产科杂志，2017（1）：122-124.
[7]邢金芳，贾莉婷，张霞，等.女性生殖道人乳头状瘤病毒多重感染的基因谱研究[J].中华医院感染学杂志，2014，24（8）：1832-1834.
[8]杨雨卿，席彦东，王晓玲.高危HPV-DNA测定联合LPT在宫颈病变筛查中的应用[J].宁夏医学杂志，2014，29（18）：3006-3009.
[9]王乐.HPV多重感染与宫颈癌及高度鳞状上皮内病变的相关性[J].中国妇幼保健，2017，32（16）：3753-3756.
[10]夏凌志，彭杰雄，连丽琴，等.女性宫颈HPV多重感染与宫颈病变临床分析[J].现代医药卫生，2016，32（12）：1909-1911.
[11]Argyri E，Tsimplaki E，Daskalopoulou D，et al.E6/E7 mRNA expression of high-risk HPV types in 849 Greek women[J].Anticancer Research，2013，33（9）：4007-4011.
[12]Tjalma WA，Depuydt CE.Cervical cancer screening：which HPV test should be used--L1 or E6/E7[J].European Journal of Obstetrics Gynecology&Reproductive Biology，2013，170（1）：45-46.
收稿日期：2018-5-8；修回日期：2018-5-20
编辑/雷华
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