儿童骨髓细胞形态学诊断结果的研究

检查以及细胞化学染色， 结合临床表现做出实验室骨髓细胞形态学诊断， 与最终临床结果进行研究比较。结果 对儿童骨髓细胞形态学进行分析， 临床诊断结果与儿童骨髓细胞形态学诊断结果符合率前三位的疾病分别是原发性血小板减少性紫癜（ITP）、缺铁性贫血（IDA）、急性淋巴细胞性白血病（ALL）。结论 骨髓细胞形态学检验对小儿的血液疾病确诊有重要意义。

【关键词】 骨髓细胞形态学；儿童；诊断；血液疾病

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.16.028

骨髓是重要的造血组织， 更是生成红细胞、血小板、粒细胞的唯一组织。除了上述外骨髓也产生淋巴细胞和单核细胞， 是人维持正常生理活动的重要组织。骨髓穿刺涂片可以观察到血细胞的形态和成分的变化， 了解骨髓是否产生病理改变以及造血功能是否异常， 所以对于血液疾病来说， 骨髓细胞形态学诊断是具有重要价值和意义的。随着工业化和城市化进程， 少儿由于其抵抗力较低， 部分器官和功能尚未发育完全， 而成为了血液疾病的高发人群。无论对其本身还是其所在的家庭来说， 心理和经济的双重压力已经成为了社会关注的重点问题之一。为了更早的诊断和治疗， 减轻患儿家庭的负担， 骨髓细胞形态学诊断成为了血液疾病诊断和鉴别的重要依据， 为临床的治疗提供了有价值的信息。目前骨髓细胞形态学诊断因其方便快捷、特异性强等特点成为了少儿血液疾病诊断的常规检验， 具有重要意义。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 所有病例为2013年1月～2014年9月本院门诊病房送检的527例少儿骨髓穿刺合格标本， 所有标本进行细胞形态学诊断和化学染色。男293例， 占总样本的55.60%， 女234例， 占总样本的44.40%；年龄2个月～14岁， 1岁以下102例， 2～5岁216例， 6～10岁141例， 11～14岁68例。

1. 2 方法 骨髓细胞学检查与判断：首先对骨髓涂片进行瑞氏-吉姆萨染色， 然后用显微镜低倍镜10×观察， 再用高倍镜40×观察， 最后用油镜100×观察， 确认标本有核细胞形态。对200个有核细胞进行计数， 并计算百分率。按照《血液病学诊断及疗效标准》[1]， 结合临床做出诊断。

细胞化学染色：为了提高诊断正确率， 弥补骨髓细胞形态学检验的部分缺陷， 采用细胞化学染色观察细胞内代谢产物或某些成分。化学染色包括过氧化酶染色（POX）、糖原染色（PAS）、氯乙酸萘酚酯酶染色（AS-DCE）、α-丁酸萘酚酯酶（α-NBE）染色、碱性磷酸酶染色（ALP）等。

2 结果

2. 1 527例儿童骨髓穿刺标本临床诊断构成， 见表1。

2. 2 骨髓细胞形态学诊断与临床诊断符合率前三位分别是ITP、ALL、IDA。临床诊断158例ITP中骨髓细胞学诊断143例， 正常5例， ALL 8例， 感染性疾病2例；白血病78例中， ALL 68例， 急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）6例， 瘤骨髓转移4例；贫血127例中， IDA 76例， 再生障碍性贫血31例， 溶血性贫血20例；发热待查72例中， 正常61例， ALL 2例， ANLL 9例；肝脾肿大32例中正常28例， ALL 4例， 其他疾病60例中无ITP、ALL、IDA。骨髓细胞诊断符合率见表2。

3 讨论

血液疾病由于表观特征特异性差、血液成分组成复杂、某些病因上尚未明确， 一般的诊断较难快速定性。骨髓细胞形态学检查由于其对血液细胞直观观察， 并采用化学染色等手段辅助判断， 所以对大部分的血液疾病的确诊起着至关重要的作用。

由于儿童自身免疫力低， 易患感染性疾病， 且随着生长发育营养需求显著增加， 容易引起营养缺乏疾病， 青春期的儿童较婴幼儿患病的比例明显下降。儿童血液疾病已经日益成为现代医学关注的重点问题之一。儿童血液疾病种类较多， 出血性贫血、继发性贫血、再生障碍性贫血、血小板减少性紫癜、血友病等属于血液疾病中的良性疾病， 而白血病是一种危害儿童健康和生命的恶性疾病。儿童白血病有急性慢性之分， 急性又分为急性淋巴细胞白血病和急性粒细胞白血病两种， 前者占所有种类白血病的大多数且治疗效果较其他疾病效果更好。

儿童患白血病的临床表现主要有发热、贫血、出血、肝脾部位的水肿。在发病早期孩子出现脸色暗淡无光、气虚乏力、不爱活动、皮肤黏膜出血、不明原因持续性发热等， 都需要警惕是否为白血病。早期发现早期治疗可以为白血病患儿争取最佳的食疗时间。急性早幼粒细胞白血病等急性白血病发病时病情非常凶险， 耽误诊断或误诊很有可能造成生命危险和无法挽回的损失。

原发性血小板减少性紫癜是免疫性综合病， 由于体内血小板遭到自身免疫破坏， 致使外周血液的血小板减少， 造成出血。而这一疾病与病毒或细菌感染有非常紧密的关联。一般成人患病前通常出现呼吸道感染现象， 多种免疫因素参与其中， 致使发病。胎儿可通过胎盘从母体获得血小板抗体， 进而造成出生后发病， 对于这一疾病治疗研究发现脾脏切除能较为有效的控制病情。

缺铁性贫血是较为常见的血液疾病症状， 主要是体内储存的铁无法满足红细胞正常生成。原因主要是铁摄入不足、吸收减少、需求增加、利用障碍或丢失过多。其发病率在发展中国家和经济不发达地区、婴幼儿明显增高。婴幼儿辅食添加不足、小儿偏食是儿童患病的主要原因。缺铁性贫血可表现为头晕眼花、心悸气短、心率加快、烦躁易怒、异食癖、皮肤干燥、毛发干枯脱落、指甲不平且薄， 易断裂等。

骨髓细胞形态学诊断对以上三种疾病的诊断符合率高， 有助于疾病的发现， 实现早诊断早治疗。除了上述三种疾病外， 对于多发性骨髓瘤、铁幼粒细胞贫血乃至某些寄生虫病， 如疟疾、黑热病等都具有良好的诊断作用。骨髓形态学诊断的准确性受许多因素影响， 如采髓部位、抽取过程、制片过程、染色过程等各个环节。

骨髓液采集使用5 ml注射器穿刺， 在胸骨柄抽取骨髓， 约0.2 ml涂片， 不宜抽取过多， 防止稀释。

为得到辨识度高的合格标本， 需使用表面光滑干燥的清洁载玻片， 推片时不应残留过多气泡影响观察。涂片薄厚应适中， 避免过厚细胞重叠以及过薄难以找到细胞。细胞形态学应特别注意涂片尾部有无原始及幼稚细胞， 以避免因制片失误造成的误诊[2]。

骨髓细胞形态学的检查， 结合其他临床资料， 对诊断、 鉴别诊断、 疗效的观察以及预后估计等方面均有重要价值[3]。在骨髓细胞形态学检查中， 通过骨髓细胞学检查和细胞化学染色联合诊断[4]， 在显微镜观察细胞的形态， 而利用染色判断病变情况， 如此协同配合检查， 提高了诊断率。

近年来， 尽管免疫学、细胞遗传学和分子生物学的检查在血液病的诊断、治疗中占据了越来越重要的地位， 但骨髓形态学分析仍然是最基本、最直观、最重要并且是不可替代的检验方法[5]。

由于有些疾病在实施治疗过程中会引发骨髓的变化， 所以应在治疗前进行骨髓检查。除骨髓检查外， 还应与外周血涂片进行同步检查， 了解细胞的全面动态。

参考文献

[1] 叶应妩， 王毓三. 全国临床检验操作规程. 南京： 东南大学出版社， 1991：68-75.

[2] 李早荣， 唐兴洲， 周巧慧， 等.骨髓有核细胞几种计数方法的比较. 中华检验医学杂志， 2004， 27（3）：160-161.

[3]熊玲， 冷文学. 儿童骨髓细胞形态学检查及临床意义. 中国医药指南， 2013， 11（4）：109-110.

[4] 邢富兴， 韩斯琴， 王丽红， 等. 难治性贫血与巨幼细胞贫血骨髓细胞形态学分析.中国医药导报， 2008， 5（13）：174.

[5]王国锋， 刘炜， 刘俊闪， 等. 1676例儿童骨髓细胞学诊断结果分析.河南医学研究， 2011， 20（4）：459-460.

[收稿日期：2014-12-25]