银杏叶提取物的抑菌活性研究

[摘要]银杏提取物具有良好的抑菌活性，本文概述了銀杏叶提取物的主要抑菌成分，从植物病原真菌、动物常见病原细菌和牙龈卟啉单胞菌3个方面综述了银杏叶的抑菌活性研究进展，比较了不同方法制备的银杏叶提取物的抑菌效果，对银杏叶提取物的抑菌活性研究进行展望。

[关键词]银杏提取物;抑菌活性;研究进展

中图分类号：TQ281

文献标识码：A

DOI：10.16465/j.gste.cn431252ts.20190423

银杏又称白果，属我国的特产资源，拥有量占全世界总量的70%以上。银杏是我国重点一级保护植物，是世界上古老的于遗植物之一。有研究表明，银杏叶及其提取物（GBE）含有黄酮类、内酯类、酚类、萜类、多糖等多种活性物质，具有抗氧化、抑菌、提高免疫、抗炎、抗病毒、降血糖、降血脂、抗肿瘤和抗癌等多种生物活性。其中黄酮类化合物种类多达40种，是银杏中活性较高的有效成分之一，广泛应用于食品、药品、保健品、化妆品等领域。有关银杏提取物的提取工艺及其生，物活性研究是当前研究的热点，其中有关银杏提取物（GBE）的抑菌性研究近年来备受关注。本文就近年来银杏提取物的抑菌活性研究情况进行综合分析，为银杏提取物的抑菌活性研究提供参考依据。

1银杏叶提取物的主要抑菌活性成分及机理

1.1多糖类化合物

多糖类化合物是银杏中重要的功能因子之一，主要存在于银杏叶中，有较强的抑菌、清除活性自由基以及抗脂质氧化的功能。目前越来越多的研究趋向于用植物多糖替代化学防腐剂，促进人类健康、食品安全以及未来医药的发展，有研究表明多糖类化合物抑菌作用的机理主要是对细胞膜通透性、核酸形成、抑制蛋白质合成、干扰细胞壁形成以及作为抗代谢物对能量代谢系统产生作用等多个方面实现抑菌作用。还有研究通过透射电镜观察来检测细胞内乳酸脱氢酶的释放，探究山苍子精油是否会对弧菌的细胞膜造成损伤作用，研究结果表明，山苍子精油会破坏弧菌的细胞膜，这对银杏多糖类化合物抑菌作用机理有一定的参考价值。

1.2黄酮类化合物

银杏叶提取物中的主要有效成分为黄酮类化合物，大部分存在于叶部，约40种，主要包括单黄酮类、双黄酮类以及儿茶素类，其中单黄酮类中的山柰素、槲皮素和异鼠李素含量最高，被认为是银杏总黄酮中真正有活性的物质。黄酮具有有效清除有毒过氧自由基、降低血脂、促进血液循环及脑循环的功能，胡筱等[131研究表明，黄酮类化合物具有良好的抑菌作用，且抑菌作用机理为黄酮类物质，属于多酚类化合物，pH值偏向酸性，可以让菌类蛋白质发生变性，或破坏细胞膜的完整性，从而使微生物产生功能性障碍，进而发挥了抑菌的作用。徐芳[141结合银杏提取物中黄酮类化合物的结构和抗微生物的作用机制，推测GBE抑菌作用机制为黄酮类化合物与糖类结合成黄酮苷，进而水解细菌细胞壁中的糖苷键，破坏细菌细胞壁的结构，从而造成菌体死亡。

1.3银杏酚酸

银杏酚酸树漆酚类物质广泛存在于银杏叶、种仁、外种皮中，大部分存在于银杏的外种皮中，可分为3类：银杏酸、银杏酚、银杏二酚。银杏酚酸因具有致敏性、致突变性及免疫毒性被认为是银杏中的有毒有害物质，但有研究表明，银杏也具有众多药理作用，如抗肿瘤、抑菌和杀菌、抗氧化和杀虫等。研究发现其对9种植物病原真菌、10种动物病原细菌、2种细菌以及4种真菌均有抑菌作用。

2银杏叶提取物的抑菌作用

2.1银杏叶提取物对植物病原真菌的抑菌作用

众多研究表明，银杏提取物对多种植物病原真菌（如柿角斑病菌、稻瘟病菌、梨锈病菌、玉米炭疽病菌、柑橘疮痂病菌、柑橘青霉病菌等）有抑菌作用，且抑菌作用的大小因银杏抑菌活性成分提取的方法的不同而不同，并且与银杏提取液中抑菌活性，成分的浓度有关。林清洪16]在银杏外种皮提取液室内抑菌、杀虫的初步研究中，做了室内抑菌实验，分离了多种植物的8种主要有害病菌（鹤望兰炭疽病菌、叶班病菌、白菜黑斑病菌、白菜炭疽病菌、辣椒立枯病菌、辣椒炭疽病菌、茄子白绢病菌、甘蓝黑斑病菌），配置了一定梯度浓度的银杏外种皮培养基，对银杏外种皮提取液的抑菌效果进行研究。结果表明，银杏提取物对8种主要病菌具有抑菌作用，且原液以及5倍稀释液浓度的银杏外种皮提取液的抑菌效果为100%（8种病菌生长速度为0），对照组病菌生长正常。同时8种病菌在银杏提取液稀释浓度为10倍的培养基上，抑菌效果也达到了45%～84%，其中对鹤望兰炭疽病菌的抑菌效果最佳，达到84%，对白菜炭疽病菌的抑菌效果最弱，为45%。

付强强等在对银杏酚酸的提取分离方法、检测方法、药理作用及制剂的研究中，总结出银杏酚酸共对9种植物病原菌有抑菌作用。孟昭礼等在对银杏提取液对4种植物病原菌的抑菌作用的研究中，分别用银杏根、茎、叶、果肉和果仁石油醚和丙酮提取液以及银杏果实的乙醇提取液进行抑菌实验，研究结果表明，银杏各器官石油醚提取液以及丙酮提取液对玉米小叶斑病菌和苹果轮纹病菌均有一定的抑菌作用，且叶部提取液的抑菌作用最强。银杏果实的乙醇提取液对苹果腐烂病菌的抑菌效果最明显，10倍和25倍提取液抑菌效果分别达到100%和50%，其次是对苹果干腐病菌的抑菌效果，10倍和25倍提取液抑菌效果分别达到68.5%和44.4%。这些研究都表明银杏提取物对植物病原真菌具有抑菌作用，且抑菌作用与银杏提取物浓度的高低有密切的关系：GBE的浓度越高，抑菌效果越明显，浓度越低，抑菌作用越小。在银杏叶对柑橘青霉病菌的抑菌作用的研究中，喻林华等发现银杏叶提取物的抑菌作用随浓度的升高而增大，但随着时间的延长，抑菌作用降低。

2.2银杏叶提取物对动物常见病原细菌的抑菌作用

目前，对银杏提取物抑菌作用的研究大多集中于对动物常见病原细菌的抑菌作用，这是当前GBE抑菌作用研究的热点，且大部分集中于研究对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌等细菌抑菌作用。多种研究表明，GBE对动物常见病原细菌具有良好的抑菌作用，其中银杏叶提取物的抑菌作用是目前研究最多的。在对银杏叶提取物抑菌效果的研究中，曲晓华等（20]认为银杏叶提取物的活性物质具有热稳定性，高温短时间加热并不影响其抗菌活性，在pH值为中性的条件下，抗菌活性是最强的。黄其春等则认为，在相同的作用时间内，银杏叶提取物的浓度越高，抑菌率越高;同浓度的银杏叶提取物在一定的时间范围内，作用时间越长，抑菌率越高;根据提取成分以及提取方法的不同，抑菌效果也有所不同。徐艳等在银杏叶提取物抑菌作用的研究中，就采用了二分法研究银杏叶提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑制作用，分别提取了银杏叶的水溶性成分和脂溶性成分，进行抑菌实验。结果表明，银杏叶的脂溶性成分提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有明显的抑制作用，水溶性提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌没有抑菌作用，说明了银杏提取物的热稳定性较好，在高温下提取并不会影响其对动物病原细菌的抑菌作用。

也有研究将银杏叶提取物的抑菌效果与一些抑菌药物相比较，来探究银杏叶抑菌作用的大小。李焰等在对银杏叶提取物体外抑菌效果的比较中，用超声波细胞粉碎机粉碎银杏叶，用65°C恒温水浸提得到银杏叶提取物，再用多种抗菌药物与银杏叶提取物进行抑菌效果的比较。结果表明，GBE对大肠杆菌的抑菌效果优于庆大霉素、恩诺沙星、磺胺嘧啶、泰乐菌素，但不及链霉素和卡那霉素;GBE对多杀性巴氏杆菌的抑菌效果优于环丙沙星、庆大霉素、磺胺嘧啶、泰乐菌素，但不及链霉素和卡那霉素;GBE对金黄色葡萄球菌的抑菌效果优于卡那霉素，但不及链霉素、环丙沙星、庆大霉素、恩诺沙星、磺胺嘧啶、泰乐菌素。金黄色葡萄球菌对GBE表现为高敏，多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌对GBE表现为中敏。李焰在对银杏叶有效成分的提取和体外抑菌效果以及肉鸡日粮中添加银杏叶的研究中，证实了GBE具有抑菌效果，可以提高肉鸡的免疫力作用，具有较好的开发应用前景。

2.3银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌作用

研究银杏提取物对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌作用，可以为研究以治疗牙周痛为目的的新型纯中药提供药理学依据，但目前银杏提取物抑菌活性成分对牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用的研究还相对较少，这为以后银杏叶提取物的开发应用提供了良好的发展前景。有研究表明，同浓度的银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌的抑菌效果大于对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果，这说明研究银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用具有较大的可实行性。姜迎春等125）认为，银杏叶提取物对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌作用，大于银杏叶片和银杏叶软胶囊的原液对牙龈卟啉单胞菌的体外抑菌作用，且抑菌作用的大小随浓度的降低而减小。

3不同方法提取银杏叶活性物质抑菌效果的比较

采用不同方法提取银杏叶活性物质的抑菌效果有所不同，由于提取的方法不同，提取的银杏叶有抑菌活性的有效成分以及浓度也会不一样。比较不同方法提取的银杏叶活性物质的抑菌效果，可以为研究具有最佳抑菌效果的提取方法提供依据。曲晓华等126就采用了常压煎煮、高压煎煮、乙醇冷浸渍、微波提取4种方法来比较银杏叶活性物质的抑菌效果。结果表明，乙醇冷浸法提取的银杏葉提取物抑菌效果最明显，其次是微波提取法，最后是常压煎煮法和高压煎煮法。其中，高压煎煮提取的银杏叶提取物抑菌效果比常压煎煮法提取物抑菌效果更明显，这说明银杏叶提取物的热稳定性好。徐齐云等[271用乙醇浸提、石油醚萃取、三氯甲烷萃取和水萃取4种方法来比较银杏提取物对柑橘青霉病菌的抑菌效果，发现石油醚萃取提取的银杏叶提取物的抑菌作用最好，三氯甲烷萃取抑菌作用次之，水萃取物的抑菌效果最低。这些研究证明了探究出更好的提取方法可以有效提高银杏提取物的抑菌效果。

4结论

银杏是我国的特产植物，在我国资源丰富。研究银杏提取物的抑菌活性可以为充分利用银杏资源提供良好的方向。银杏提取物的抑菌活性成分可以在种植中代替农药，以及应用在可食用性动物中，实现真正的无农药、兽药残留，为人体健康提供保障。研究银杏提取物的抑菌活性成分具有一定的药用价值和经济价值，目前银杏中很多抑菌活性成分还未被发现，其还有很多药用价值等待被研究出来，银杏提取物抑菌活性的研究具有较大的研究空间。但目前面临的最主要的问题是银杏提取物中抑菌活性物质的纯化，只有将活性物质纯化出来才能研究出相对应的产品，实现资源利用最大化，也能为获得更大的经济效益提供物质基础。

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