直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病中的诊断应用

【摘要】目的研究直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病中的诊断应用。方法呼吸道感染的患者690例, 采取患者鼻咽深部的分泌物, 应用直接免疫荧光法测定呼吸道腺病毒(ADV)、合胞病毒(RSV)、流感病毒A型(InfA)、流感病毒B型(InfB)以及副流感病毒(PIV)等7种病毒的抗原。结果呼吸道病毒检测阳性者240例, 占34.8%, 其中呼吸道腺病毒(ADV)12例, 占5.0%, 合胞病毒(RSV)169例, 占70.4%, 流感病毒A型(InfA)18, 占7.5%, 流感病毒B型(InfB)2例, 占0.8%以及副流感病毒(PIV1)39例, 占16.3%。结论直接免疫荧光法病毒抗原测定可以用于呼吸道病毒感染诊断。

【关键词】直接免疫荧光法；病毒抗原测定；呼吸道感染；诊断

上呼吸道感染大多数是由病毒感染导致的, 特别是青少年阶段和儿童时期病毒感染比较频繁。随着技术的发展, 病毒检测在呼吸道感染的诊断中越来越重要［1］。本文研究直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病中的诊断应用, 现将结果报告如下。

1资料与方法

1. 1一般资料选取本院收治的呼吸道感染的患者690例, 其中成人27例, 儿童663例, 男428例, 女262例, 年龄介于1个月~83岁。

1. 2检测方法应用美国Diagnostic Hybrids公司的呼吸道病毒抗原检测试剂盒, 应用荧光显微镜、37℃的水浴箱以及涡旋振荡器。检测材料应用绒植试子、载玻片以及盖玻片。将配套的绒植试子经过鼻腔插入到鼻咽部大约有7~8 cm处, 然后来回的旋转2~3次后迅速的抽出试子, 然后放入到塑料试管中。将标本点样在载玻片上, 然后风干后浸没在冷丙酮中固定10 min, 取出晾干, 然后滴加D3试剂1滴, 完全覆盖待测标本。将载玻片防止培养箱中孵育15~30 min, 然后在玻片中央加一滴封闭液盖上盖玻片观察标本。

2结果

呼吸道病毒检测阳性者240例, 占34.8%, 其中呼吸道腺病毒(ADV)12例, 占5.0%, 合胞病毒(RSV)169例, 占70.4%, 流感病毒A型(InfA)18, 占7.5%, 流感病毒B型(InfB)2例, 占0.8%以及副流感病毒(PIV)39例, 占16.3%。见表1。

表1患者病毒的阳性检测率(n, %)

病毒阳性例数阳性率

ADV125.0

RSV16970.4

InfA187.5

InfB20.8

PIV3916.3

3讨论

病原学检测是呼吸道感染诊断的重要方法, 对于治疗也具有一定的指导意义, 据统计95%以上的呼吸道感染以及大部分的下呼吸道感染是由细菌以外的病原体引起的, 其中以病毒感染最为常见［2］。所以在临床上早期快速的检测出呼吸道的病毒具有较大的临床意义, 对指导用药具有重要的价值。有报道显示呼吸道的病毒抗原检测阳性的患者在接受抗菌药物治疗的时候可以明显的缩短患者的用药治疗时间, 减少抗菌药物的使用和住院时间。对于呼吸道病毒的检测主要的方法有核酸检测、分离培养以及抗原抗体的检测, 有学者认为病毒感染需要应用免疫荧光法检测和病毒培养或者是聚合酶链反应来确认［3］。可能和其他地方的检测阴性结果无法排除掉流感病毒的感染有很大的关系。现阶段的检测方法来说, 其中分离培养是检测的金标准, 但是该方法消耗时间比较长, 不利于早期指导临床的用药, 因此其价值性较低［4］。PCR技术敏感性比较高, 但是其实验要求也比较高, 成本相对较高, 很难进行普及应用。抗原抗体的检侧方法应用较广泛, 但是由于IgM抗体一般是呼吸道病毒感染6 d以后才可以检测到, 其检测的周期也相对较长, 临床应用比较范围窄。而直接免疫荧光法抗原检测具有简便、快速而且检验的成本比较低, 有利于在临床上普及应用［5］。本文研究发现, 呼吸道病毒检测阳性者240例, 占34.8%, 说明免疫荧光法检测阳性率比较确切, 具有一定的疗效。其中以合胞病毒(RSV)的阳性率最高, 阳性人数169例, 其阳性率为70.4%, 其次是副流感病毒(PIV)阳性率最高, 阳性的例数为39例, 其阳性率占16.3%。而流感病毒B型(InfB)阳性率较低, 只有2例阳性患者, 其阳性率占0.8%。该检测结果和国内外的许多报道一致。说明直接免疫荧光法病毒抗原检测在呼吸道感染疾病的诊断中具有较好的效果, 能较早的指导临床用药。

综上所述, 直接免疫荧光法病毒抗原检测是一种简便、快速而且实用的检查方法, 可以对呼吸道感染的病毒病原体做出早期的快速的诊断, 进而指导临床的用药, 从而降低患者抗病毒药物的应用, 缩短住院时间。

参考文献

［1］陈辉兰.直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病诊断中的应用.中外医学研究, 2013, 11(31):53-54.

［2］俞小卫, 王亚楠, 程宝金, 等.直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病诊断中的应用.检验医学, 2013, 28(01): 76-79.

［3］马燕, 于翠香.273例急性呼吸道感染患儿呼吸道病毒抗原检测结果及分析.山东医药, 2012, 56(15):75-76.

［4］雷小英, 彭东红.2009-2011年重庆地区儿童呼吸道病毒感染流行特征分析.重庆医科大学学报, 2013, 38(09):1052-1057.

［5］金玉霞, 苗正友, 宋勤浩.嘉兴地区呼吸道感染患儿的病毒病原学分析.中华医院感染学杂志, 2013, 23(21):5239-5243.

［收稿日期：2014-04-10］