[摘要] 目的 观察螺旋藻多糖（PSP）对乙酸烧灼型胃溃疡大鼠血清中活性成分的影响，初步探讨其治疗胃溃疡的可能机制。 方法 采用乙酸烧灼法制备实验性胃溃疡大鼠模型，将50只Wistar大鼠随机分成正常组、模型组、奥美拉唑组和PSP高、低剂量（400、200 mg/kg）组，每组各10只，连续药物治疗15 d后取血，分别采用硝酸还原酶法、黄嘌呤氧化酶法及硫代巴比妥酸法测定大鼠血清中一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。 结果 PSP高低剂量组与奥美拉唑组均能升高血清NO含量[（26.71±6.47）、（32.60±4.65）μmol/mL]，提高血清SOD活力[（292.74±52.44）、（303.57±13.80）U/mL]，降低MDA含量[（15.60±2.39）、（15.57±2.19）nmol/mL]，与模型组比较差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。 结论 PSP具有一定的抗胃溃疡的作用， 其机制可能与提高血清NO含量和SOD活性、降低MDA含量有关。
[关键词] 螺旋藻多糖；胃溃疡；一氧化氮；丙二醛；超氧化物歧化酶
[中图分类号] R573.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）07（b）-0017-03
消化性溃疡是临床常见病多发病[1-2]，此病若不能及时对症治疗，很容易发生穿孔、出血、梗阻及溃疡癌变等并发症。西药，尤其是质子泵抑制剂和组胺H2受体阻滞剂广泛的应用，其短期愈合已成为可能，但存在副作用较多、停药后容易复发等问题[3-4]。螺旋藻多糖（polysaccharide from spirulina platensis，PSP）是从螺旋藻培养液中提取分离出来的主要成分之一，具有促进细胞生长、提高免疫力、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、对核酸内切酶活性和DNA修复合成有增强作用等功能的重要天然生物活性物质，PSP药理作用非常广泛[5]。
本实验通过制备实验性胃溃疡大鼠模型，观察PSP对溃疡大鼠血清中一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的影响，探讨PSP对实验性胃溃疡大鼠胃黏膜的修复和治疗作用，为新型抗溃疡药物在临床的应用研究提供可靠的理论基础。
1 材料与方法
1.1 实验动物
健康清洁级Wistar大鼠，雌雄各半，50只，体重为190～240 g[由沈阳医学院基础医学院动物实验中心提供，动物合格证号：SCXK（辽）2008-0012]。
1.2 实验试剂
PSP由沈阳医学院化学教研室提供，纯度为84.1%；奥美拉唑（山东罗欣药业股份有限公司提供，药品批号G20033 444），给药前需加蒸馏水配成混悬液；大鼠SOD检测试剂盒、NO检测试剂盒及MDA检测试剂盒（均由南京建成生物工程研究所提供，批号20061129）。
1.3 实验方法
1.3.1 动物分组与给药 取Wistar大鼠50只，雌雄兼用。随机分为五组，每组各10只，分别为正常组、模型组、奥美拉唑组、PSP高和低剂量组，除正常组以外，大鼠胃溃疡动物模型的建立参照文献[3]进行。奥美拉唑组及PSP高、低剂量组造模第2天后分别灌服奥美拉唑（1.8 mg/kg）和PSP药液（200、400 mg/kg）。
1.3.2 乙酸烧灼胃溃疡模型的建立 除正常组10只外，其余各组40只大鼠手术制作乙酸烧灼法胃溃疡动物模型，参照文献[6-7]方法。造模前1 d大鼠禁食，自由饮水。给每只大鼠腹腔内注射1%戊巴比妥钠（30 mg/kg）麻醉，麻醉后10 min，仰卧位把大鼠固定在手术台上，碘伏常规消毒腹部，在剑突下沿腹中线稍左剪口约3 cm，在肝脏后找到胃，将胃托起移出腹腔，避开血管，将直径为5 mm的圆形滤纸蘸100%的冰醋酸贴在胃前壁窦体交界近幽门处浆膜面上，30 s后取下，再换滤纸重复1次。然后换干净滤纸把胃壁表面的冰醋酸吸去，再用生理盐水冲洗，用大网膜覆盖冰醋酸贴面处，将胃还纳入腹腔，逐层缝合肌层和皮肤，切口周围再次碘伏消毒。
1.3.3 血清样本采集 用20%乌拉坦溶液（5 mL/kg）向大鼠腹腔内注射，麻醉后打开腹腔，于腹主动脉取血5 mL离心10 min后，取上清液2 mL，置-20℃冰箱内待测备用，用于测定血清NO水平、SOD活力及MDA含量等各项生化指标。严格按照试剂盒说明书的步骤进行各项生化指标的检测。
1.4 生化指标的观察及方法
722紫外可见分光光度计（上海光谱仪器公司生产）。血清中NO含量的测定：采用硝酸还原酶法测定其代谢产物；血清SOD活力的测定：采用黄嘌呤氧化酶法；血清MDA水平的测定：采用硫代巴比妥酸法。
1.5 统计学方法
应用SPSS 15.0中文统计软件进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（x±s），进行单因素方差分析，组间比较采用t检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血清一氧化氮含量的影响
与模型组比较，PSP高剂量组、奥美拉唑组血清NO含量均有显著性增高（P > 0.05），PSP低剂量组NO含量无明显变化（P > 0.05）。见表1。
2.2 血清中丙二醛含量比较
与模型组比较，PSP高剂量组与奥美拉唑组血清MDA含量明显降低（P < 0.01）；PSP低剂量组MDA含量无明显变化（P > 0.05）。见表1。
2.3 血清SOD活力的比较
与模型组比较，PSP高剂量组与奥美拉唑组大鼠血清SOD活力明显升高（P < 0.05），PSP低剂量组SOD活力含量无明显变化（P > 0.05）。见表1。
3 讨论
胃黏膜除了接触高浓度的胃酸外，还受到胃蛋白酶、微生物、药物、幽门螺旋杆菌和其他有害物质的侵袭[8-9]。正常情况下，胃黏膜能够抵御这些侵袭因素的损害，因为胃黏膜自身有保护因素，包括黏膜血流量、黏液/碳酸氢盐屏障、细胞膜的完整性、细胞的再生、前列腺素等[10]。消化性溃疡发生是由于对胃十二指肠黏膜有害作用的侵袭因素与黏膜自身防御修复因素之间失去平衡的结果。胃黏膜在这些有害物质的刺激下，可发生脂质过氧化反应，产生大量氧自由基，导致胃黏膜的损伤[11]。
氧自由基是导致胃黏膜损伤的重要致病因子，SOD和MDA是反映体内氧自由基代谢的重要指标。SOD是存在于生物体内重要的抗氧化的酶类之一，可以消除超氧阴离子自由基，减少自由基对胃黏膜的损伤，从而对胃黏膜起到保护作用[12-13]。MDA是脂质过氧化反应的终末产物，是一个衡量自由基代谢的非常敏感的一个指标，MDA含量增加表示机体受自由基的损害程度比较重[14]。本研究结果显示，胃溃疡模型组血清SOD活力降低，而血清MDA含量明显升高，表明氧化应激损伤在胃溃疡发生中起到很重要的作用。螺旋藻多糖的应用可影响大鼠血清中SOD的活力和MDA的含量，PSP高剂量组可显著升高胃溃疡大鼠血清中SOD活力，降低MDA含量，表明PSP的治疗作用与抗氧化、清除氧自由基从而保护胃黏膜有关。
NO是一种重要的调节血管舒张功能的因子，它的生物学作用还包括调节机体的免疫反应、清除氧自由基、保护内皮细胞不受氧化应激损伤等功能，如果NO水平下降，可导致血管收缩，胃黏膜缺血缺氧[15-16]。本研究观察了PSP对胃溃疡大鼠血清NO水平的影响，PSP高剂量组NO水平明显升高，与奥美拉唑相似，表明通过PSP对胃溃疡大鼠的治疗，可以改善胃黏膜的血流量，从而起到对胃黏膜的保护性作用。
目前胃溃疡的治疗主要依赖抗酸药和抗胆碱药，但这些药物都有一定的副作用，而且溃疡治愈后也有一定的复发率，因此目前好多学者都在努力寻找疗效好、副作用小的抗消化性溃疡的药物。PSP的药理作用非常广泛，本实验结果表明，PSP可以增高血清SOD活力和NO水平，降低MDA含量，作用接近于奥美拉唑，可减少胃溃疡大鼠的胃黏膜氧化应激损伤，为抗消化性溃疡药物的研发提供了一个广阔的前景。
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（收稿日期：2013-04-20 本文编辑：张瑜杰）
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