[摘要] 目的 探讨Livin蛋白在大肠癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系。 方法 免疫组化S-P法检测60例大肠癌手术切除标本中Livin蛋白的表达，并探讨其与患者组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移和远处转移等临床病理特征的关系。另取30例癌旁正常的大肠组织（距肿瘤边缘＞5 cm）作对照。 结果 Livin蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织（P ＜ 0.01）。大肠癌组织中Livin表达水平与组织分化程度无明显的关系（P ＞ 0.05），随原发病灶的浸润深度、淋巴结转移和远处转移呈逐渐增加趋势（P ＜ 0.01或P ＜ 0.05）。 结论 Livin蛋白表达不仅与大肠癌的发生和发展密切有关，而且参与了大肠癌的局部侵袭、转移过程。
[关键词] 大肠癌；免疫组化；Livin蛋白；临床病理特征
[中图分类号] R735.3+4 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2012）04-0112-02
The expression of Livin protein in colorectal cancer tissues and its relationship with clinical pathological features
FANG Xiaobin
Department of Oncology, Jinhua People′s Hospital in Zhejiang Province, Jinhua321000, China
[Abstract] Objective To investigate the expression of Livin protein in colorectal carcinoma and its relationship with clinical pathological features. Methods Immunohistochemistry S-P method was used to detect the expression of Livin protein in 60 cases of surgical specimens of colorectal cancer, and to explore its relation with clinical pathological features such as the degree of differentiation, depth of invasion, lymph node metastasis, distant metastasis and so on. Another 30 specimens of adjacent normal colon tissue (from the edge of the tumor> 5 cm) were taken as the control group. Results The expression of Livin protein in colorectal cancer tissues was significantly higher than that in adjacent normal tissue (P ＜ 0.01). There was no significant relationship between the expression of Livin protein and the degree of differentiation (P ＜ 0.01) in colorectal cancer tissue. But it showed a gradually increasing trend (P ＜ 0.01 or P ＜ 0.05) with the primary tumor depth of invasion, lymph node metastasis and distant metastasis. Conclusion Livin protein not only has a close relationship with the development and progression of colorectal cancer, but also it gets involved in the local invasion of colorectal cancer and its metastasis.
[Key words] Colorectal cancer; Immunohistochemistry; Livin protein; Clinical pathological features
凋亡抑制是肿瘤发生和发展的重要作用机制，凋亡途径的调节紊乱及相关基因表达失调，都会导致肿瘤的发生与发展，且几乎所有的化疗药物都通过诱导肿瘤细胞的凋亡来杀死肿瘤细胞。Livin是近年来研究新发现IAPs家族的抑制细胞凋亡的基因，特异性表达于人的胚胎组织以及大多数人类实体瘤组织，对抑制细胞凋亡起着重要作用。近年来相关研究发现Livin的异常表达与肿瘤的形成、发展、转移和预后关系密切[1，2]。本研究采用免疫组化法检测60例大肠癌组织中Livin蛋白的表达，并初步探讨其与患者的临床病理特征的关系，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 标本来源
收集我院肿瘤科2006年1月～2010年12月术后病理证实的大肠癌手术标本60例，其中男38例，女22例；年龄32～89岁，平均（63.1±7.8）岁。术前未行任何化疗、放疗。另取30例癌旁正常的大肠组织（距肿瘤边缘＞5 cm）作对照。
1.2 免疫组化染色
采用免疫组化S-P法进行检测，严格按照免疫组化试剂盒的说明书进行实验操作。用正常未免疫兔血清代替一抗作阴性对照，用PBS代替一抗作空白对照，用已知阳性切片作阳性对照。免疫组化S-P试剂盒以及兔抗人Livin多克隆抗体均由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。
1.3 结果判定
阳性细胞是指以细胞浆内或细胞核内出现棕黄（褐）色颗粒，其中细胞无着色或阳性细胞的比例＜5％为阴性（－），阳性细胞比例5％～25％为弱阳性（＋）；阳性细胞比例25％～50％为中等阳性（＋＋）；阳性细胞比例>50％为强阳性（＋＋＋）。
1.4 统计学处理
应用SPSS13.0统计学软件进行检测，采用χ2检验，以P ＜ 0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 Livin在大肠癌及癌旁正常组织中的表达
Livin主要在大肠癌胞浆中表达，部分病例也可见到胞浆和胞核同时着色。见图1。60例大肠癌标本中Livin的阳性表达为37例（61.7%），其中强阳性为13例（20.2%）。30例癌旁正常大肠组织中仅4例（13.3%）Livin蛋白表达阳性，且均为弱阳性。Livin蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织（χ2=18.84，P ＜ 0.01）。
2.2 Livin在大肠癌中的表达与临床病理特征的关系
肠癌组织中Livin表达水平与组织分化程度无明显的关系（P ＞ 0.05），随原发病灶的浸润深度、淋巴结转移和远处转移呈逐渐增加趋势（P ＜ 0.01或P ＜ 0.05）。见表1。
3 讨论
大肠癌的发生、发展是一个多病因、多阶段、有步骤进展的病理过程，其中促癌基因的激活与抑癌基因的失活导致细胞异常生长、增殖是大肠癌发生和发展的重要分子机制。Livin是近年新发现IAPs家族中的一种细胞凋亡抑制基因，全长7.6Kb，内有7个外显子和6个内含子，主要通过其BIR区与Caspase结合，抑制Caspase的活性，尤其是抑制Caspase-3/-7和Caspase-9的活性，达到阻断凋亡受体和以线粒体为核心的外源性及内源性凋亡途径来发挥细胞凋亡的抑制作用，还可通过激活TAK1/JNK1信号通路来抑制肿瘤细胞的凋亡，与肿瘤发生、发展、转移和预后密切相关[3，4]。
近年来国内外的研究发现Livin基因与大肠癌的发生、发展关系密切，张旭宏等[5]研究发现Livin蛋白在大肠癌、良性大肠肿瘤和正常大肠组织的阳性率分别为70%、50%和0%，提示Livin基因参与了正常大肠组织-异常分化-癌前病变-癌组织的发生发展过程。本研究结果发现大肠癌组织中Livin蛋白阳性率明显高于癌旁正常组织（P ＜ 0.01），表明Livin基因在大肠癌的发生和发展中起了重要作用。菅金波等[6]研究发现大肠癌中Livin蛋白与肿瘤的浸润深度、病理分期、临床分期和远处转移关系密切，大肠癌中Livin蛋白表达与患者的预后密切有关，是预示大肠癌患者长期生存的独立危险因子。何剪太等[7]研究发现Livin蛋白是大肠癌诊断与治疗的一个重要的生物学指标，其异常表达是评价大肠癌转移和放化疗疗效的一个重要指标，Livin基因有望成为大肠癌基因诊断与治疗的新靶点。本研究结果发现大肠癌组织中Livin表达水平与组织分化程度无明显的关系（P ＞0 .05），随原发病灶的浸润深度、淋巴结转移和远处转移呈逐渐增加趋势（P ＜ 0.01或P ＜ 0.05），表明Livin蛋白表达不仅与大肠癌的发生和发展密切有关，而且参与了大肠癌的局部侵袭、转移过程，Livin基因有望成为大肠癌基因诊断与治疗的新靶点。但有关Livin基因在大肠癌发生发展过程中与抑癌基因相互作用的关联性和作用模式仍需深入研究和探讨。
[参考文献]
[1] Choi J, Hwang YK, Sung KW, et al. Expression of Livin, an antiapoptotic protein, is an independent favorable prognostic factor in childhood acute lymphoblastic leukemia[J]. Blood, 2007, 109（2）：471-477.
[2] Kasof GM, Gomes BC. Livin, a novel inhibitor of apoptosis protein familly member[J]. Biol Chem，2001，276（5）：32-38.
[3] Ka H, Hunt JS. Temporal and spatial patterns of expression of inhibitors of apoptosis in human placentas[J]. Am J Pathol, 2003，163（2）：413-422.
[4] 刘海波，陈涛，孔垂泽. 凋亡抑制蛋白家族新成员LIVIN的研究进展[J]. 医学综述，2007，13（7）：495-497.
[5] 张旭宏，王旭林，李博，等. 凋亡抑制因子Livin在结肠癌组织中的表达和意义[J]. 中国误诊学杂志，2009，9（20）：4792-4794.
[6] 菅金波，葛莲英，罗小玲，等. Livin蛋白在人大肠癌组织中的表达及临床意义[J]. 中国癌症防治杂志，2011，3（1）：43-46.
[7] 何煎太，李珍发，张阳德，等. 凋亡抑制因子Livin在大肠癌中的表达意义[J]. 中国现代医学杂志，2007，17（6）：654-657.
（收稿日期：2011-09-28）
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