不同类型淋巴瘤患者的外周血EB病毒检测价值

检查确诊，依据WHO 2008年淋巴瘤新分类标准[3-4]进行组织形态学分型。80例明确诊断为淋巴瘤的患者中，男52例，女28例;年龄9～78岁，中位发病年龄55岁;肿瘤来源及部位：鼻咽部及鼻腔淋巴瘤10例，浅表淋巴结内淋巴瘤46例（其中来源颈部淋巴结22例、腋窝淋巴结14例、腹股沟淋巴结10例），胃肠组织淋巴瘤15例，纵隔巨大包块淋巴瘤6例，皮肤淋巴瘤2例，宫颈组织淋巴瘤1例。本研究经医院医学伦理委员会审核批准。

1.2方法

通过实时荧光定量PCR检测初治前患者外周血EBV-DNA拷贝数。按EBV-DNA拷贝数分为EBV-DNA阳性（≥500 IU/ml）和EBV-DNA阴性（<500 IU/ml），分析外周血EBV-DNA在不同类型淋巴瘤之间的表达情况。

1.3观察指标

观察不同部位来源的淋巴瘤、不同组织学类型的淋巴瘤中EBV-DNA表达情况。比较淋巴瘤患者中不同年龄、性别、B症状以及Ann Arbor临床分期中EBV-DNA的表达情况。

1.4统计学方法

采用统计学软件SPSS 19.0分析数据，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验;计数资料以率表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1不同部位淋巴瘤外周血中EBV-DNA的阳性表达

来源于鼻腔/鼻咽部和纵隔组织的淋巴瘤患者中，T、NK/T细胞淋巴瘤患者外周血EBV阳性表达率明显高于B细胞淋巴瘤患者，差异均有统计学意义异（P<0.05）;来源于其他部位肿瘤的组织形态学分型阳性表达率比较，差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

2.2不同组织学类型淋巴瘤EBV-DNA的陽性表达

非霍奇金淋巴瘤患者与霍奇金淋巴瘤患者的EBV阳性表达率比较，差异无统计学意义（P>0.05）;T、NK/T细胞淋巴瘤患者EBV阳性表达率（72.0%）明显高于B细胞淋巴瘤患者（40.0%），差异有统计学意义（P<0.05）（表2）。

2.3淋巴瘤不同临床特征外周血EBV-DNA的阳性表达

不同年龄、性别及有无B症状的外周血EBV-DNA的阳性表达率比较，差异无统计学意义（P>0.05）;Ann Arbor分期Ⅰ～Ⅱ期患者中EBV-DNA阳性表达率（34.4%）明显低于Ⅲ～Ⅳ期患者（62.5%），差异有统计学意义（P<0.05）（表3）。

3讨论

大量研究显示，淋巴瘤的发生与EBV感染密切相关，但其发生机制尚不明确。有研究显示，EBV可能通过上调Bcl-2以及其他抑制凋亡的蛋白，激活NF-κB信号传导通路导致IL-10表达增多，使细胞间的增殖与凋亡失衡，引起淋巴细胞克隆性增殖和肿瘤的发生[5-6]。随着临床对EBV在淋巴瘤发病中作用的深入研究，认为外周血EBV-DNA可作为诊断EBV相关疾病的重要检测指标，众多学者和专家认为通过检测外周血EBV-DNA载量可作为临床上诊断、分期以及评估淋巴瘤病情进展及预后的重要参考指标[7-8]。

EBV在不同类型的淋巴瘤患者中存在差异。本研究结果显示，T、NK/T细胞淋巴瘤EBV-DNA阳性表达率明显高于B细胞淋巴瘤，差异有统计学意义（P<0.05）。可能是因为NK/T细胞淋巴瘤恶性程度较高，其发生与EBV感染更加密切相关[9]。EBV是一种B淋巴细胞病毒，可使NK/T细胞感染致EBNA1表达激活活性氧导致染色体畸变、LMP1诱导表达survivin，激活NF-kB、PI3K/Akt通路而抑制细胞凋亡，促使肿瘤发生[10]。NK/T细胞淋巴瘤几乎都与EBV相关，大多数患者肿瘤组织中均可检出EBV、外周血也能检测出EBV-DNA[11]。有文献报道，EBV阳性的弥漫大B细胞淋巴瘤预后较阴性患者差[12]。因此监测EBV-DNA可在临床上评估肿瘤负荷及治疗效果，以及帮助不同类型淋巴瘤治疗结束后对最小残留病灶的评估[13]。随着目前PCR技术的发展，众多学者关注外周血EBV-DNA与淋巴瘤预后的关系，发现外周血EBV-DNA是淋巴瘤的不良预后指标，且可动态监测EBV-DNA，及时了解淋巴瘤状态，为临床上判断疗效提供依据[14]。

本研究结果显示，Ann Arbor分期Ⅰ～Ⅱ期患者中EBV-DNA阳性表达率（34.4%）明显低于Ⅲ～Ⅳ期患者（62.5%），差异有统计学意义（P<0.05）。提示临床分期晚期的患者EBV阳性表达率高，提示病情较严重，预后较差。可认为外周血EBV-DNA阳性的患者生存期较短，针对这部分淋巴瘤患者需行强化疗、自体造血干细胞移植或加入临床试验等治疗。但因本研究病例数较少，样本量小，还需通过大样本研究、多中心研究来进一步证实该结论。

综上所述，EBV感染与淋巴瘤的发生密切相关，外周血EBV-DNA检测对淋巴瘤诊断、预后判断具有较好的应用价值，且检测手段方便，快捷。EBV针对不同类型的淋巴瘤患者，表达存在差异[15]，因此对于淋巴瘤患者是否存在EBV感染应引起临床医师的重视，早发现、早治疗，降低EBV相关淋巴瘤的发生率。

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（收稿日期：2018-09-13  本文编辑：刘克明）